本试剂盒采用酶谱法(zymography)检测MMP-2、MMP-9活性。Zymography是一种广为使用的、基于SDS-PAGE电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法,其灵敏度可达1nM,高于ELISA方法2,其基本原理和程序是:制备加有胶原酶底物的SDS-PAGE凝胶,含蛋白酶的样品在此凝胶中进行电泳,电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer孵育,凝胶染色与脱色。凝胶中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景,但在有蛋白酶条带的位置,蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白,因而不被染色而形成透亮区域,从而能同时指示MMP-2、MMP-9的大小位置(酶谱)及活性。本试剂盒提供
MMP-2、MMP-9特异蛋白底物及酶学反应缓冲液,可检测少至0.1~0.5µl血液中的MMP-2、MMP-9酶谱及活性,检测灵敏度~1nM。试剂盒可进行50次标准小胶检测,如果小胶加样孔为10~15个,则总计可检测500~750个样品。
明胶酶谱法试剂盒
适用:检测MMP-2、MMP-9酶谱及活性(DetectMMP2andMMP9aslowas1nM)。组成与储存(50assays):
1.2×SDS-PAGEnon-reducingbuffer1.5mlµl,?20ºC;
2.10×SubstrateG,50ml,?20ºC;
3.10×BufferA,50ml,4ºC,使用时用蒸馏水稀释;
4.10×BufferB,50ml,4ºC,使用时用蒸馏水稀释;
5.SDS-PAGE凝胶蛋白质考马斯亮蓝染色液,4ºC。
更多:明胶酶谱法试剂盒
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